利用聚合脢連鎖反應─酵素免疫分析法快速鑑定病原真菌

李淑英

2003年 第19卷 第7期

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摘要:

過去二十年以來對病原真菌易罹性個體不斷增加,助長了病原真菌的感染趨勢。正確的種別鑑定對於病原真菌的診療及防治十分重要。傳統的型態及生化鑑定方法費時且易流於主觀,因此,本文評估發展PCR-EIA方法應用於鑑定臨床上重要真菌之可行性。原理為將Candida albicans, Candida glabrata, Candida guilliermondii, Candida krusei, Candida parapsilosis, Candida tropicalis and Cryptococcus neoformans 等真菌全細胞或抽取的DNA 用泛真菌引子ITS1及ITS4增幅rRNA片段,將增幅片段與digoxigenin標誌的種別專一性探針雜合後,再以EIA進行呈色反應。本方法之專一性100%, 靈敏度與PCR-電泳凝膠法相當可達10 CFU/50μl或1pg/50μl。以51株臨床及7株標準菌株測試結果,與綜合germ tube , Viteck及API20C的生理生化鑑定法結果符合度達100%。本PCR-EIA 方法提供了傳統鑑定方法以外的另一種選擇。